SEERNA® CISH RNA显色原位杂交试剂盒
详细介绍:
SEERNA® CISH RNA显色原位杂交试剂盒是基于单分子RNA显色原位杂交技术(single molecule chromogenic in situ hybridization, smCISH)开发,该技术建立在DNA锁式探针和滚环扩增技术基础之上,可特异性实现mRNA和部分lncRNA等单靶标基因的组织原位表达定位和验证,具有高效率检出、高特异性以及实验耗时短等优点。该款试剂盒更适用于自发荧光背景高且无多靶标共检需求的样本,例如在临床FFPE样本开展某个靶点或Biomarker的RNA表达验证工作,也可用于HIV、HCV和HPV等外源性感染病毒的组织检测。
技术原理
该技术基于锁式探针(padlock probe)开发,无须进行逆转录,可用于固定的细胞或组织中靶标RNA的高灵敏、高特异检测。锁式探针是一段由两个具靶向结合功能的首尾识别区及非靶向依赖的中间序列组成的线性单链DNA探针,只有当其与靶分子完全互补杂交时,才能被DNA连接酶连接成环,以环化的产物为模板进行滚环扩增,生成大量扩增产物。最后,扩增的产物再与HRP标记的检测探针杂交,在底物DAB存在的情况下,HRP可催化生成棕色沉淀物,在明场显微镜下被检测到。通过检测细胞内棕色沉淀的多少,评估待测RNA的表达情况。
产品优势
(1)具有高检出、高特异、耗时短的优点
(2)可应用于神经、肿瘤、发育及药物开发等领域,对客户更友好,软硬件要求更低
(3)适用于多种组织类型(人、小鼠的多种组织来源)、多种样本制备方式(实现常规样本类型全覆盖)
(4)更适用于自发荧光背景高且无多靶标共检需求的样本
数据展示
(1) 乳腺癌样本HER2检测(非特殊型浸润性癌)
(2) lncRNA原位杂交检测结果
(3) HPV E6/E7 mRNA原位杂交检测结果
文章发表
2023年10月份,华侨大学医学院柯荣秦团队在Microbiology Spectrum杂志上发布文章Novel In Situ Hybridization Assay for Chromogenic Single-Molecule Detection of Human Papillomavirus E6/E7 mRNA,该研究开发一种新的人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA 的原位杂交检测方法,结果表明宫颈上皮内肿瘤HPV E6/E7 mRNA原位杂交结果与临床诊断实验室 H&E 染色和 p16 免疫组织化学检测结果一致,在CIN分级诊断中具有应用价值。
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